淋病患者做的檢查項目
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淋球菌實驗室檢查包括塗片,培養檢查淋球菌、抗原檢測,藥敏試驗及PPNG測定,基因診斷。
(一)塗片檢查:
取患者尿道分泌物或宮頸分泌物,作革蘭氏染色,在多形核白細胞內找到革蘭氏陰性雙球菌。塗片對有大量膿性分泌物的單純淋菌性前尿道炎患者,此法陽性率在90%左右,可以初步診斷。女性宮頸分泌物中雜菌多,敏感性和特異性較差,陽性率僅爲50-60%,且有假陽性,因此世界衛生組織推薦用培養法檢查女病人。慢性淋病由於分泌物中淋球菌較少,陽性率低,因此要取前列腺按摩液,以提高檢出率。
咽部塗片發現革蘭氏陰性雙球菌不能診斷淋病,因爲其他奈瑟菌屬在咽部是正常的菌羣。另外對症狀不典型的塗片陽性應作進一步檢查。
(二)培養檢查:
淋球菌培養是診斷的重要佐證,培養法對症狀很輕或無症狀的男性、女性病人都是較敏感的方法,只要培養陽性就可確診,在基因診斷問世以前,培養是世界衛生組織推薦的篩選淋病的唯一方法。
(三)抗原檢測
1.固相酶免疫試驗(EIA):可用來檢測臨牀標本中的淋球菌抗原,在流行率很高的地區而又不能作培養或標本需長時間遠送時使用,可以在婦女人羣中用來診斷淋球菌感染。
2.直接免疫熒光試驗:通過檢測淋球菌外膜蛋白I的單克隆抗體作直接免
疫熒光試驗。但目前在男女二性標本的敏感不高,特異性差,加之實驗人員的判斷水平,故該實驗尚不能推薦用來診斷淋球菌感染。
(四)基因診斷
1.淋球菌的基因探針診斷
淋球菌的基因探針診斷,所用的探針有:質粒DNA探針,染色體基因探針和rRNA基因探針。
2、淋球菌的基因擴增檢測
上面講述的探針技術檢測淋球菌的方法,雖然比培養方法在靈敏度,特異性和方便性上有了很大的提高,但其仍有一定的侷限性,如多數情況下需要標本的淋球菌濃度很高,PCR技術和連接酶鏈反應的出現進一步提高了檢測淋球菌的靈敏性,它具有快速、靈敏、特異、簡便的優點,可以直接檢測臨牀標本中極微量的病原體。
3. 臨牀基因診斷淋球菌的注意事項
目前臨牀檢測淋球菌的基因診斷方法主要採用PCR方法,但是該方法在臨牀檢測中應注意幾個問題。
(1)引物設計 除了以上所列的淋球菌PCR引物外,還可從在其它基因上設計,但是引物序列應具有特異性。因爲細菌的染色體較大,許多基因序列並沒有搞清楚;同時細菌之間或近或遠有一定的同源性,而且細菌所含質粒序列間也存在同源性,因此設計引物一定要進行基因數據庫比較分析,同時進行特異性和靈敏性實驗,從中選擇引物進行臨牀檢測。
(2)臨牀標本處理 對臨牀標本來講,PCR模板要求越純越好。這就要求在採集標本時要取到準確的位置,對於無症狀患者要適當多采樣,以保證採集到病原體細菌。另外由於臨牀標本成分比較複雜,有時簡單處理的標本PCR擴增效果並不理想,這可能是由於雜質過多造成的,需要進一步純化,如用酚一氯仿抽提法純化,結果將會好轉。這種純化方法比較麻煩,目前已有商品化的DNA純化試劑盒,可以較簡便地從臨牀標本中提取高純度的DNA。
(3)PCR產物的檢測方法 不久以前臨牀PCR檢測淋球菌幾乎都採用電泳的方法進行PCR產物的鑑定。該方法存在許多問題,如由於肉眼觀察的主觀性而造成假陽性和假陰性的結果。目前用雜交顯色法代替電泳法,提高了結果判斷的特異性和靈敏性。
總之,PCR方法與LCP方法比傳統的培養法在靈敏性和特異性上有了很大的提高,時間也大大縮短。隨着基因診斷技術的不斷改進。PCR方法與LCP方法在淋球菌的檢測將會成爲常規的檢測方法。
(五)藥敏試驗:在培養陽性後進一步作藥敏試驗。用紙片擴散法做敏感試驗,或用瓊脂平皿稀釋法測定最小抑菌濃度(MIC),用以指導選用抗生素。
(六)PPNG檢測:β-內酰胺酶,用紙片酸度定量法,使用Whatman I號濾紙PP-NG菌株能使其顏色由藍變黃,陽性爲PPNG,陰性爲N-PPNG。
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